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针对高效液相色谱仪在做含有缓冲液的流动相时一般要冲多久的柱子

时间:2019-11-17    作者:admin    来源:未知

  高效液相色谱仪,做完样品以后一般柱子冲多久保存柱子,我师父说,在进流动相之前,和做完样品以后,冲洗柱子。都要看基线平不平,但我问朋友,他说是根据柱长来的.......

  高效液相色谱仪,做完样品以后一般柱子冲多久保存柱子,我师父说,在进流动相之前,和做完样品以后,冲洗柱子。都要看基线平不平,但我问朋友,他说是根据柱长来的....

  柱长决定流动相的缓冲时间。按照标准执行,需要冲10倍的柱体积。不过如果是研发做实验,通常会节省一些时间。250mm的长柱都是至少要冲色谱柱半个小时也就够了。

  反相色谱柱,比如C8和C18色谱柱会先用10%的甲醇水(或乙腈水)来过渡半小时,然后冲缓冲盐的流动相平衡进样。结束后用10%的甲醇水(或乙腈水)过渡半小时,然后用纯甲醇(或纯乙腈)保存色谱柱半小时。

  这样做的主要原因是,流动相中的缓冲盐不可以直接遭遇纯有机相。因为溶解度等原因,可能会出现盐析现象。所以会用甲醇水做过渡。

  各种缓冲液的极性不同,柱子填充的料也不同,所以冲洗的时间不一样,一般要冲30-60分钟后换不同等级的甲醇或乙腈,

  各种缓冲液的极性不同,柱子填充的料也不同,所以冲洗的时间不一样,一般要冲30-60分钟后换不同等级的甲醇或乙腈,不会吧,缓冲盐一般用水冲上上一小时,换上甲醇或已腈冲上半小时,应该没问题的呀,

  用完缓冲液后,一般我用10:%甲醇冲30、40分钟,然后用纯甲醇冲30、40分钟;实际是根据柱长来的,一般是十倍柱体积。25的柱子柱体积20ml左右,15的柱子柱体积10ml左右。

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